1983年，Trounson报道使用冷冻保存和融解的人类胚胎移植首例妊娠成功。此后冷冻保存胚胎用于辅助生育技术得以推广。1987 年之前 3 577 个胚胎用各种方法冷冻保存融解、移植，大约 50%（1 794个）融解后有存活力，其中 1 119个进行了胚胎移植。结果 163例获得妊娠（13.4% ），其中自然流产占 26% ，宫外孕 4% ，此外 2 例宫内及临产时诊断胎儿畸形。

　　首例活产的人类胚胎是用了不同于目前广泛使用的冷冻保存法。此例 胚 胎 系 用1.5mol/L的 DMSO 冷冻保存。在室温中将冷冻保存液浓度每隔 10min逐步增加。在培养液（PBS）中，DMSO 的初始浓度为 0.25mol/L，以后则逐步增加到 0.5、1.0 和 1.5mol/L 浓度。DMSO 浓度达到 1.5mol/L 后，培养剂中的胚胎以 2℃ /min的速率从室温冷却到 - 6℃ ，然后进行人工种植并在 -6℃ 保持 30min。试管再以 0.3℃ /min速率冷却到 - 80℃ ，然后放入液氮内（ -196℃ ）贮存。在融解时试管中胚胎从液氮中转移到 - 80℃ 控制箱，再以 8℃ /min速率融解到 +4℃ 。将 DMSO 逆向稀释。应用上述方法冻融处于 4-细胞或 8-细胞发育阶段的胚胎，则 68/136胚胎存活，其半数或多一些卵裂球保持完好。68个胚胎移植到 45个患者中后结果导致 9例临床妊娠。

　　一、用 DM SO 冷冻保存胚胎的方法

　　（1）胚胎放入冷冻玻璃瓶或管子内。

　　（2）胚胎从 +23℃ 开始，以 2℃ /min的速率冷却到 -6℃ 。

　　（3）种植并在 -6℃ 保持 10min。

　　（4）胚胎以 0.1℃ /min速率冷却到 -80℃ 。

　　（5）投入液氮内。

　　（6）在室温（ +23℃ ）下加入 DMSO，每隔 10min增加浓度 0.25mol/L，直到 1.5mol/L。

　　用 DMSO 冷冻保存卵裂胚胎而获临床妊娠的报道发表不久，Cohen等报道应用冷冻 /融解人类囊胚获得活产婴儿。该报道称体外受精获得的胚胎，受精后在人工环境内可放置4～ 7d。如囊胚继续发育，则将胚胎放进 Earl液中，在室温下加入甘油，经过 6 个不同的步骤，使甘油最后的浓度达到 8% ～ 10% 。然后将胚胎放进试管内，从室温开始以 1℃ /min速率降到 -7℃ ，进行手工种植。此后以 0.3℃ /min速率将试管冷却到 -36℃ ，然后投入液氮中。