更新时间：2011-01-12 14:39:29
Studyonsensitiveindexesofacuteliverdamageinducedbycarbontetrachloride
TongYing,YanXiangdong,GaoShan,etal.（ChineseJournalofFoodHygiene.）
Tostudythetimeeffectpatternofbiochemicalindexesandliverpathologicaldamageinacutelivedamageratsreducdebycarbontetrachloride,themalewistarratswerefedwithcarbontetrachloridewiththedoseof160mg/kgBW.Thebiochemicalindexesandliverpathologicaldamagesafter12,24,48,and72hoursweredetected.TheserumGPT,GOTincreasedsignificantlycomparedwithcontrolsandthepeaktimewas24hours,after72hoursgetright.MDA,TGandGSHincreasedseparatelyafter12hr,12～48hr,12～48hrinliver.Typicalliverpathologicalchangementcouldbeenseenafter12,24,48hours.ItcanbeconcludedthatserumGPT,GOTandliverpathologicaldamagesafter12～48hourscouldbedetectedtomeasureacuteliverdamageinducedbycarbontetrachloride.TheMDA,GSHandTGinlivercouldbedetectedassecondaryindexes,inordertoassesshealthfoods.Author''sadderss TongYing,BeijingMunicipalCenterforHygieneandEpidemiccontrol,100013PRCKeywords DiseaseModels,Animal CarbonTetrachloride LiverDiseases Rats,Wistar
四氯化碳是肝脏毒理学中研究较多的亲肝性毒物，对肝脏具有较强的损伤作用，可导致肝细胞的变性、坏死、脂肪变性、纤维化和癌变。［1］对四氯化碳急性肝损伤敏感指标的研究可为建立急性肝损伤动物模型，评价保健食品的保肝功能提供科学依据。
1 材料与方法1.1 动物 Wistar种大鼠，雄性，体重180～220g，由预防医学科学院流行病学研究所实验动物中心提供。1.2 肝损伤阳性对照物 四氯化碳（CCl4）分析纯，北京化学试剂公司生产，试验时以植物油稀释。1.3 试验方法 选用50只健康雄性大鼠，随机分为5组，每组10只。试验组动物给予2%CCl4经口染毒，灌胃量0.5mL/100gBW，折合剂量为160mg/kgBW，阴性对照组给予植物油。各组动物实验前隔夜禁食16h（供水），灌胃后给予正常饮食。分别于染毒后12、24、48、72h（对照组给油后24h）处死动物取静脉血测定血清GPT、GOT、TG含量，取肝右叶制成10%肝匀浆测定MDA、GSH、TG含量，取肝左叶进行病理组织学检查。本实验所获数据用“Excel7.0）软件进行统计。1.4 测定方法 血清谷丙转氨酶（GPT）和谷草转氨酶（GOT）的测定，均用赖氏法（试剂盒），北京化工厂生产。血清甘油三脂（TG）的测定，用甘油磷酸氧化酶过氧化物酶法（试剂盒），北京化工厂生产。肝匀浆中丙二醛（MDA）测定，采用TBA比色法。肝匀浆中还原型谷光甘肽（GSH）测定，使用DTNB比色法。［2］蛋白定量，用考马斯亮蓝比色法。肝脏病理组织学检查，常规制片，HE染色，镜检。
2 结果2.1 以160mg/kgBWCCl4对大鼠染毒后血清GPT、GOT含量显著性升高，24h达到峰值后逐渐下降，72h接近正常，结果见表1。2.2 以160mg/kgBWCCl4对大鼠染毒后12h肝组织中MDA含量显著性升高；GSH含量12～48h显著性升高。结果见表2。2.3 以160mg/kgBWCCl4对大鼠染毒后血清TG无明显变化，肝组织中TG含量12h显著性升高，48h后恢复正常。结果见表3。
表1 CCl4对大鼠血清GPT、GPT的影响
组 别动物数GPTU/LGOTU/L阴性对照10 26.8±0.43 175.9±18.09 12h组10103.4±39.67（1）392.7±37.11（1）24h组10253.6±16.23（1）532.8±50.84（1）48h组10127.5±75.76（1）292.1±66.49（1）72h组1035.9±16.02224.7±73.06
注：与阴性对照组比较：（1）P<0.01。表2 CCl4对大鼠肝脏MDA、GSH的影响
组 别动物数MDAnmol/mg蛋白GSHμmol/g肝重阴性对照10 2.53±0.59 368.7±25.04 12h组105.17±1.17（2）488.4±42.28（2）24h组102.94±0.70454.9±34.08（2）48h组103.01±1.25389.2±22.25（1）72h组104.00±3.67394.4±50.24
注：与阴性对照组比较：（1）P<0.05，（2）P<0.01。表3 CCl4对大鼠血清和肝脏TG的影响
组 别动物数血清TGmg/dL肝TGmg/10g肝组织阴性对照10 31.42±7.41 60.54±20.30 12h组1026.15±3.86113.77±20.84（2）24h组1035.73±7.8277.22±7.37（1）48h组1032.09±10.6757.87±8.1972h组1029.70±5.5577.36±19.88
注：与阴性对照组比较：（1）P<0.05，（2）P<0.01。2.4 病理组织学检查结果显示染毒后12、24、48h各组大鼠肝脏均出现典型四氯化碳中毒的病理变化，主要表现为弥漫性肝小叶中心带中间带肝细胞气球样变伴小叶中心管肝细胞胞浆凝聚。72h组大鼠肝脏病变较轻，仅可见个别肝小叶中心散在单个细胞气球样变及小点状炎细胞浸润。3 讨论 四氯化碳对肝细胞的损伤作用使肝细胞内GPT、GOT释出，引起血清中该酶的活性大大增高。四氯化碳的毒性作用机理是多方面的，是脂质过氧化作用，三氯甲烷自由基与蛋白质共价结合导致蛋白质合成抑制和脂质分泌能力降低，后者可引起肝细胞内TG的蓄积。［3，4］MDA是脂质过氧化作用的代谢产物，含量高低可反映脂质过氧化的程度。GSH是由以半胱氨酸、谷氨酸与甘氨酸为原料的三肽物质，具有多种主要的生理功能，解毒功能是其中之一，很多能形成亲电子代谢产物的化学毒物能直接或间接打击GSH，使其耗竭。但以较低剂量的四氯化碳染毒时可出现肝脏GSH含量代偿性增高。［5］ 本次研究结果表明：检测四氯化碳所致肝损伤可在染毒后12～48h测定血清GPT、GOT，进行肝脏病理组织学检查。此外，肝组织中MDA、GSH和TG含量的测定也可作为检测的辅助指标，有助于评价保健食品的保肝功能。
童英（北京市卫生防疫站，北京 100013）闫向东（北京市卫生防疫站，北京 100013）高珊（北京市卫生防疫站，北京 100013）熊晓燕（北京市卫生防疫站，北京 100013）
［1］ 江泉观.基础毒理学［M］.北京：化学工业出版社，1991，132～143上一篇文章：农村高血压病呈“一高三低”
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