实验室检查： 1.血象  白细胞总数常在正常范围内但偶尔亦可升高25%患者白细胞超过10.0×109/L少数可达(25.0～56.0)×109/L。分类以中性粒细胞或嗜酸粒细胞稍增多血小板减少。直接库姆斯(coombs)试验可阳性。血沉在发病初期阶段可增快。

2.培养法  因肺炎支原体营养要求高，生长缓慢，需观察10～30天或更长时间对临床诊断帮助不大。目前国外仍使用美国疾病控制中心(CDC)推荐的Hayflied培养基，国内多用首都儿科研究所以马丁培养基或猪肺消化液为基础的培养基

3.血清学方法  补体结合试验：是诊断肺炎支原体感染广泛使用的血清学诊断方法取急性期和恢复期双份血清效价呈4倍增长者或单份血清效价≥1∶32者判为阳其敏感性可达90%，特异性为94%仅初次感染时出现阳性，再次感染时常不出现阳性反应

间接血凝试验：主要检测IgM抗体。此后7天出现阳性。10～30天达高峰12～26周逐渐降低。急性期采血宜早，否则不易测出4倍增高的抗体特异性尚不理想，与补结试验相似。

酶联免疫吸附试验：用于检测IgM和IgG抗体方法敏感、特异性高、快速经济，是诊断肺炎支原体感染实用可靠的手段现已有ELISA试剂盒出售

冷凝集试验：是一种诊断肺炎支原体感染的非特异性试验，有33%～76%感染者为阳性(效价≥1∶32)。效价越高该病的可能性越大，常在发病的第一周末或第二周初出现阳性反应，持续约2～4个月。此试验在婴幼儿腺病毒副流感病毒等引起的肺炎和呼吸道感染也可出现假阳性反应。

4.核酸杂交试验  用放射性同位素(32P125I等)标记的核酸探针技术进行肺炎支原体检测此法虽灵敏度高且特异性较强但要求条件也较高需要使用同位素故难于在临床推广。

5.聚合酶链反应(PCR)  自1992年该法用以检查肺炎支原体感染的临床标本。从综合结果看PCR法检测的阳性率明显高于培养法(灵敏度比普通培养法高10～100倍)，也明显高于血清学和探针杂交法其特异性也较强，与其他支原体无交叉反应，且不受口腔其他菌污染的干扰所需时间较短因而采用PCR法可争取早日确诊以指导临床合理用药。在中枢神经系统出现症状时快速可靠的诊断更为必要由于此法相当敏感，故实验操作时应特别小心，避免污染。
 
其它辅助检查： 肺部X线检查可见模糊云雾状或均匀一致的阴影，近肺门部较致密，向外逐渐变浅，边缘不清楚，通常不侵犯整叶绝大多数为一叶受累以下叶多见左下最多右下次之，侧位20%左右有少量胸腔积液，10%左右见肺不张偶见胸膜炎肺部病变通常在2～3周吸收，完全吸收需4～6周小儿约30%伴有肺门淋巴结肿大