【摘要】目的探讨神康灵对坐骨神经损伤后神经再生及对脊髓角神经元的保护及调控作用方法采用42只成年体重200g的Wistar鼠，随机分成2组（实验组和对照组），分别于术后4周和6周，通过肌电图检测坐骨神经运动诱发电位的传导速度和波幅;组织学检测有髓神经轴突目、横截面积;于术后6、8周通过扫描电镜检测脊髓前角神经元的形态和超微结构的变化;脊髓前角切片HE染色，从而探讨坐骨神经损伤后，神康灵对神经再生和脊髓前角神经元的保护调控作用。结果4周和6周时，实验组神经传导速度、再生的有髓神经纤维横截面积、数目均优于对照组;6和8周时，实验组脊髓前角神经元变性的程度明显小于对照组;存活的数量明显于对照组。结论神康灵对坐骨神经损伤后的神经再生有明显的促进作用，对脊髓前角神经元有明显的保护和调控作用。

　　关键词坐骨神经损伤神康灵脊髓前角神经元神经再生

　　Anmedicalregulationandcontrolexperimentalstudyonnerveregeneration

　　andchangesofspinalcordanteriorhornfollowingperipheralnerveinjury

　　XieShengwei，YinWeitian，WeiZhuang，etal.

　　DepartmentofHandSurgery，China-JapanUnionHospitalofJilinUniversity，Chanchun130031.

　　【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheprotectionandregulationeffectofcompoundChineseherbsnamedshenkanglingtonerveregenerationandneuronsofspinalcordanteriorhornfollowingperipheralnerveinjuryinrats.MethodsForty-twoadultwistarratsweighingabout200gwererandomlydividedintotwogroups（experimentalgroupandcontrastgroup）.Theratsweresacrificedonpostoperativeweek4，6，8respectivelytodetectmotorinducedpotentialconductionvelocityandamplitudeofsciaticnervebyelectromyography:Thenumberofmyelinatednerveaxonandcorsssectionareaofmyelinatednerverfiberweredetectedbyhistology;Themorphologicchangesandtheultraˉstructuralchangesthroughscanningelectronmicroscope.Hestainingofspinalcordanteriorhornwasusedtoinvestiˉgatetheprotectionandregulationeffectofshenkanglingtonerveregenerationandneuronsofspinalcordanteriorhornfollowingnerveinjury.ResultsItwasfoundthatneveconductionvelocity，regeneratedmyelinatednervefibercrosssectionareaandnumberofnervefiberweresuperiortothoseofthecontrastgroup，andtheneuronaldegenerationlevelinspinalcordanteriorwaslessintheexperimentalgroupthaninthecontrastgroup，thememberofsurvialneuronsweresignificantlyhigherintheexperimentalgroupthaninthecontrastgroup.ConclusionShenkanglinghadtransˉparentimpovementeffecttonerveregenerationandprotectionandregulationeffecttoneuronsofspinalcordanteriorhornfollowingnerveinjury.

　　Keywordssciaticnerveinjuryshengkanglingspinalcordanteriorhornneuronsnerveregeneration

　　周围神经损伤在临床工作中比较常见。周围神经损伤与再生是手术以外还可应用某些药物来预防和调控神经元变性坏死，也可以使受损的神经元恢复功能，促进周围神经的再生。因此，为了防止周围神经损伤后其相应的神经元发生变性死亡，进一步提高损伤的周围神经再生后的功能，我们设计并进行了如下实验。

　　1材料和方法

　　1.1实验动物及分组成年Wistar大鼠42只，雌雄不限，体重为200g左右。随机分成3组，每组14只。实验组为双侧坐骨神经切断后，口饲神康灵（人参、丹参、当归、黄芪、生地等复合中药合剂）;对照组为切断双侧坐骨神经后，口饲生理盐水组。所有实验动物均由本校动物部提供。

　　1.2手术方法用2.5%戊巴比妥钠（50mg/kg）将大鼠腹腔注射麻醉后，分别在大鼠左、右两侧股外侧肌间隙进入显露双侧坐骨神经，在梨状肌下缘距坐骨神经干1cm处，用止血钳（将止血钳夹到最大位置）夹30s，使坐骨神经的神经连续性中断，造成SunderlandⅣ°损伤。缝合切口，局部包扎。

　　1.3饲养方法实验组口饲神康灵（2ml/只/d）;对照组口饲生理盐水2ml/只/d。

　　1.4取材和切片分别在4、6周和8周后，在2.5%戊巴比妥钠（50mg/kg）将大鼠腹腔注射麻醉下，剪开胸腔，显露心脏，将11号针头插入左心室，于左心房开一小口。先自左心室灌注生理盐水250ml迅速冲净组织内血液，直至流出液为无色为止，然后以4%多聚甲醛PBS液50ml灌注心脏30min，直至大鼠僵硬为止。沿原切口，在大鼠左侧股外侧肌间隙进入显露左侧坐骨神经，以梨状肌下缘距坐骨神经干1cm处为中心，分别向远、近端各0.5cm处切取坐骨神经。在大鼠脊柱背侧正中纵向切开，去除竖脊肌，用尖嘴咬骨钳咬去棘突和椎弓板，切开硬脊膜，显露脊髓，取L4～6节段脊髓（即腰膨大处），所有标本常规固定，脱水，石蜡包埋，切片，切片厚度5μm。每隔5张取2张切开。

　　1.5检测方法

　　1.5.1肌电图于第4和6周时在2.5%戊巴比妥钠（50mg/kg）腹腔麻醉下，行实验组和对照组肌电图（传导速度、波幅）检查。

　　1.5.2再生神经形态学观察有髓神经轴突计数比较实验组和对照组有髓神经轴突的数目。

　　1.5.3有髓神经纤维的横截面积比较实验组和对照组有髓神经纤维横截面积的差异。

　　1.5.4电镜分别观察实验组和对照组神经细胞的超微结构。即在电镜下观察神经元胞体的大小、与周围组织之间的关系、染色质、内质网和线粒体的变化情况、胶质细胞的形态、数量和巨噬细胞的数量。比较两组之间的差异。

　　1.5.5神经细胞计数通过HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统（同济医科大学），在高倍视野下，对脊髓前角神经元细胞进行计数。比较两组之间的差异。

　　1.5.6数据分析与处理实验组和对照组之间用t检验进行显著性分析。

　　2.1肌电图结果口饲中药的实验组在术后4、6周，运动神经传导速度较对照组明显加快，波幅亦大于对照组，两者差异具有显著性。（见表1）。

　　表1电生理检测结果统计学分析

　　2.2组织学与形态学检查分析结果在HE染色示所有标本中，实验组单位截面中有髓神经纤维数目、横截面积均显著优于对照组，两者差异具有显著性意义（见表2，表3）。

　　表2有髓神经轴突计数结果

　　表3有髓神经纤维的横截面积

　　2.3电镜结果

　　2.3.1实验组神经元胞体与周围神经毡之间无间隙，核膜规则，核内常染色质多，大量的呈堆分布的粗面内质网及线粒体，部分线粒体可见轻度的肿胀，空泡化不明显（见图1）。图1

　　2.3.2对照组神经元与周围组织有较大间隙，神经元细胞为暗细胞，核边缘不规则，胞体基质呈致密状，神经毡内神经元突起呈空泡状，神经丝减少，线粒体呈凝聚状，肿胀明显，空泡化重，多数线粒体嵴断裂，可见较多粗面内质网和脂褐素，粗面内质网脱颗粒，溶酶体减少，形态不规则（见图2）。图2

　　2.4神经细胞计数结果实验组在各时间组的脊髓前角运动神经元数目，均明显多于对照组。两者差异具有显著性（见表4）。表4脊髓（腰膨大）前角神经元计数结果

　　3.1促进周围神经再生和神经元保护的临床意义损伤后的周围神经再生，不仅要恢复其结构的连续性，

　　3.2神康灵对坐骨神经再生的促进作用及保护调控作用周围神经再生是一个相当复杂的过程，受到局部微环境乃至整体多