胎膜早破孕妇血清及羊水中细胞因子的变化

中华围产医学杂志 1998年第1期第1卷 论　　著

作者：张为远 王丽　张艳丽　叶青

单位：（130041　长春，白求恩医科大学第二临床学院妇产科）张为远；（长春，****军第208医院妇产科）王丽　张艳丽　叶青

　　关键词： 胎膜早破；白细胞介素6；肿瘤坏死因子；绒毛膜羊膜炎

　　【摘要】　目的　探讨细胞因子联合监测在胎膜早破中的作用。　方法　采用放射免疫法和酶联免疫吸附实验对46例胎膜早破孕妇母血清、羊水中白细胞介素(IL)-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α水平进行监测，并以正常足月妊娠孕妇26例做对照组。　结果　胎膜早破孕妇母血清中IL-6、IL-8和羊水中IL-6、IL-8，肿瘤坏死因子-α水平均较正常足月妊娠组高，差异显著(P＜0.01;P＜0.05);母血清中肿瘤坏死因子-α虽高于对照组，但差异不显著(P＞0.05)；随着破膜时间延长母血中IL-6、IL-8和羊水中IL-6、IL-8及肿瘤坏死因子-α有增加趋势；绒毛膜羊膜炎患者13例，其母血、羊水中上述三种细胞因子水平均明显高于非绒毛膜羊膜炎患者，差异显著(P＜0.05)。　结论　细胞因子联合监测对识别胎膜早破孕妇存在绒毛膜羊膜炎起辅助诊断作用。

　　The Changes of Cytokine in the Amniotic Fluid and Maternal Serum in Patients with Premature Rupture of Membranes　Zhang Weiyuan,Wang Li,Zhang Yanli,et al.Second Teaching Hospital,Bethune University of Medical Sciences,Changchun,130041

　　【Abstracts】　Obstective　To study the role of determining some cytokines in patients with premature rupture of membranes(PROM).　Methods　The 26 normal term pregnant women as control,46 patients with premature rupture of membrane were enrolled for study.Maternal serum and amniotic fluid IL-6,IL-8 and TNF-α levels were detected by a sensitive radioimmunoassy and an enzyme labded immnosorbentassay.　Results　The maternal serum IL-6,IL-8 levels and amniotic fluid IL-6,IL-8 and TNF-α levels in PROM group were higher than those of control,there were significant difference (P＜0.05-P＜0.01),Although the levels of TNF-α in maternal serum were higher than those of control (P＜0.05).There were significant relationship between maternal IL-6,IL-8,TNF-α and duration of the pemature rupture of membranes,the longer was time the higher were the maternal IL-6,IL-8 and TNF-α;there were 13 cases patients complicated with chorioamnionitis,and their maternal serum and amniotic fluid IL-6,IL-8 and tNF-α were higher than those of nonchorioamniotinis(P＜0.05).　Conclusion　Determining cytokine is valuble clinical index for identificating the chorioamnionitis in patients with premature rupture of membranes.

　　【Key words】　Fetal membranes,premature rupture　　Interleukin-6　　Tumor necrosis factor

　　许多文献报道细胞因子是妊娠过程中的重要辅助因子，参与妊娠过程的始终，但是当其含量异常增高或降低均表现为病理妊娠。胎膜早破是产科常见的并发症，是产妇及围产儿发病率增高的原因之一［1］，因其病因不清，目前尚无完善的预防措施。现已公认，胎膜早破的原因主要为感染，但是并不是所有感染的孕妇都有临床症状，对亚临床感染的孕妇临床上现无相应的检测指标，本文对46例胎膜早破孕妇和26例正常足月孕妇母血清和羊水中细胞因子包括［白细胞介素(IL)-6，IL-8，肿瘤坏死因子(TNF)-α］含量的监测，探讨其对识别胎膜早破孕妇患绒毛膜羊膜炎中的作用。

资料与方法

　　一、研究对象

　　1996年12月至1997年5月来我院分娩的胎膜早破孕妇46例，取血和羊水前均未应用抗生素并均为阴道分娩，随机抽取正常足月顺产者26例作对照组。胎膜早破组平均年龄27.2±3.0岁，平均孕周37.1±2.8周，对照组平均年龄26.9±3.2岁，平均孕周39.1±2.1周，两组孕妇均无内科及产科合并症。

　　二、方法

　　1.标本采集及处理：所有胎膜早破孕妇在确诊破膜后，窥器扩张阴道，宫颈阴道常规消毒，手触宫底用试管接取宫颈口流出的羊水2～3 ml，正常足月妊娠组均于宫口开大2～3 cm时，窥器扩张阴道，宫颈阴道常规消毒，用注射器接16号针头抽取前羊水3 ml，所得羊水经离心2 500 rpm 10分钟后留取上清液待测，两组孕妇均于临产前抽取肘静脉血3 ml，经上述离心处理后留取血清。所有样本均在-30 ℃保存，集中测定，两组孕妇均在产后取胎膜约2 cm×2 cm，送病理。

　　2.测定方法：TNF-α放射免疫法试剂盒(国产)，由北京东亚免疫技术研究所提供，IL-6 ELISA试剂盒由北京邦定生物医学公司提供，操作方法严格按药盒说明进行。

　　3.诊断标准：胎膜早破标准参考《临床产科学》［1］，经下述检查可以确诊为胎膜早破：(1)阴道宫颈消毒后，在窥器直视下手触宫底见宫口有羊水流出者；(2)pH试验呈碱性；(3)阴道后穹窿液涂片检查见胎脂或毳毛。绒毛膜羊膜炎：病理诊断标准为胎膜组织呈炎症细胞浸润反应，组织水肿。临床诊断标准为孕妇体温升高＞37.8℃，胎心率＞160 次/分，羊水有臭味，孕妇白细胞计数升高，子宫有压痛。

　　4.数据处理采用t检验。

结　果

　　一、胎膜早破孕妇母血羊水中IL-6、IL-8、TNF-α水平的变化

　　结果显示出胎膜早破孕妇羊水中IL-6、IL-8、TNF-α和母血中IL-6、IL-8明显高于对照组，差异显著(P＜0.01;P＜0.05)。见表1。

表1　胎膜早破孕妇血和羊水中IL-6、IL-8、TNF-α水平的变化(±s ng/L)

分组 例数 羊水 母血 IL-6 IL-8 TNF-α IL-6 IL-8 TNF-α 胎膜早破 46 160±113 382±204 919±425 82±21 270±92 1 488±412 对照组　 26 33±20 174±123 428±277 32±18 189±83 1 314±408 P值 　 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＞0.05

　　二、破膜时间与母血、羊水中IL-6、IL-8和TNF-α水平的变化关系

　　结果显示，羊水中IL-6、IL-8及TNF-α和母血中IL-6、IL-8随破膜时间的延长而增高，尤其破膜时间超过24小时增高更为明显。见表2。

表2　破膜时间与母血、羊水中IL-6、IL-8、TNF-α水平变化的关系(±s ng/L)

分组

　　(h) 例数 羊水 母血 IL-6 IL-8 TNF-α IL-6 IL-8 TNF-α ＜16 20 138.3±102 256±60 649±201 40.2±21.7 190±84 1616±104 16～24 14 190.5±120 376±281 804±163 51.9±17.9 365±62 1 608±414 ＞24 12 230.8±159 598±101 1 237±495 94.5±43 453±91 1 930±356 P值 　 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＞0.05

　　三、母血、羊水中IL-6、IL-8及TNF-α水平与绒毛膜羊膜炎的关系

　　结果表明对72例孕妇进行胎膜病理检查，绒毛膜羊膜炎患者13例，胎膜早破组占12例，其中符合临床诊断者仅有2例，而正常妊娠组经病理学检查证实为绒毛膜羊膜炎者仅占1例，并无临床症状。测定结果显示绒毛膜羊膜炎患者母血羊水中IL-6，IL-8，TNF-α水平明显高于非绒毛膜羊膜炎患者，差异显著(P＜0.01～0.05)。见表3。

表3　绒毛膜羊膜炎孕妇母血羊水中IL-6、IL-8、TNF-α水平的变化(±s ng/L)

分组 例数 羊水 母血 IL-6 IL-8 TNF-α IL-6 IL-8 TNF-α 绒毛膜羊膜炎　 13 323±188 701±82 1 298±485 104±113 380±102 1345±509 非绒毛膜羊膜炎 59 　28±14 223±69 634±365 　35±19 111±76 998±238 P值 　 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.05 ＜0.05

讨　论

　　一、IL-6、IL-8、TNF-α的产生及生物学效应

　　IL-6、IL-8、TNF-α均为糖蛋白，主要来源有纤维细胞、上皮细胞、巨噬细胞、单核细胞、肝细胞、绒毛膜、羊膜细胞、滋养层细胞、蜕膜细胞等［2］，它们的受体在人体分布广泛，以中性粒细胞膜上较多，该三种细胞因子均为多效应细胞因子，它们参与人体的免疫、抗肿瘤、抗感染、组织损伤、正常细胞蛋白及脂代谢、细胞程序化死亡、胚胎生长发育等一系列病理生理过程。有国外学者研究证明IL-8、TNF-α在妇女妊娠末期达高峰，可能与参与分娩发动有关［3～4］

　　二、IL-6、IL-8、TNF-α在胎膜早破中的作用

　　胎膜早破的主要原因来自于感染，可对母儿造成危害［5］。IL-6、IL-8和TNF-α均为重要的炎症介质，当绒毛膜羊膜感染时机体对细菌及其代谢产物产生应答，以巨噬细胞、羊膜、绒毛膜细胞、蜕膜细胞、上皮细胞等产生的IL-6、IL-8、TNF-α直接释放入血和羊水，尤其以羊水中IL-8半衰期时间较长，故其敏感性和特异性较其它炎性介质(如IL-1，IL-2)高［6］，本研究表明胎膜早破孕妇母血中IL-6、IL-8和羊水中IL-6、IL-8、TNF-α水平均明显高于对照组，母血中TNF-α虽高于对照组，但差异不显著，说明母血中细胞因子监测TNF-α敏感性不如IL-6、IL-8；本研究结果表明，破膜时间越长，母血中IL-6、IL-8和羊水中IL-6、IL-8、TNF-α水平越高，阐明破膜时间越长，孕妇感染机会越多，然而并不是破膜超过24小时孕妇都存在感染，盲目应用抗生素无疑会给母儿带来不必要的副作用和经济负担，例如在临床我们经常遇到妊娠28～32孕周破膜者，如果一直应用抗生素维持到胎儿成熟，需要漫长的时间，孕妇可以产生耐药性和增加肝肾负担，所以我们主张对胎膜早破孕妇母血和羊水中细胞因子进行监测，当其含量增高时给孕妇应用抗生素，如胎儿成熟尽快结束分娩。我们研究72例孕妇中，有13例患绒毛膜羊膜炎，只有2例有临床症状，余下1例处于亚临床感染状态，常被产科医生所忽视。本实验结果表明绒毛膜羊膜炎孕妇母血、羊水中上述三种细胞因子均明显高于非绒毛膜羊膜炎患者，进一步证实IL-6、IL-8、TNF-α的监测对存在绒毛羊膜炎的重要性，尤其以羊水中IL-6、IL-8更为敏感，而且取之方便对母体损伤小，所以通过母血和羊水中IL-6、IL-8、TNF-α的监测，可以作为识别胎膜早破孕妇存在亚临床感染的一个诊断标志，尤其以监测羊水中细胞因子含量，其取材方便孕妇易接收，具有临床应用前景。从而对胎膜早破孕妇存在亚临床感染时给予及时诊断和治疗，从而降低孕产妇及围产儿发病率。

参考文献

　　1　张志诚.临床产科学.第1版.天津：天津科学技术出版社，P213-215.

　　2　Fortunato SJ,Menon RP,Swan KF,et al.Inflammatory cytokine(interleukinel,6,and 8 and tumor necrosis factor-α) release from cultured human fetal membranes in response to endotoxic lipopolysaccharide mirrors amniotic fluid concentrations.Am J Obstet Gynecol,1996,174:1855-1862.

　　3　Opsjon SL,Warhen NC,Tingulstad S,et al.Tumor necrosis factor interleukin-1,and interleukine-6 in normal human pregnancy.Am J Obstet Gynecol,1993,169:397-404.

　　4　Maradny EE,Kanayama N,Halim A,et al.Stretching of fetal membranes increases the concentration of interleukin-8 and collagenase activity.Am J Obstet Gynecol,1996,174:843-849.

　　5　Murtha AP,Greig PC,Jimmerson CE,et al.Maternal serum interleukin-6 concentrations in patients with preterm premature rupture of membranes and evidence of infection.Am J Obstet Gynecol,1996,175:966-969.

　　6　Romero R,Yoon BH,Mazor M,et al.A comparative study of the diagnostic performance of amniotic fluid glucose,white blood cell count,interleukine-6,and Gram stain in the detection of microbial invasion in patients with preterm premature rupture of membranes.Am J Obstet Gynecol,1993,169:839-851.

(收稿：1998-02-04　　修回：1998-03-26)